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大鼠ELISA試劑盒操作的任一步驟出錯都會影響測試結果
點擊次數:879 更新時間:2019-02-28
   對于任何一種ELISA試劑盒來說,保存工作都是使用者需要注意的,這樣才不會影響到試劑盒的運用,大鼠ELISA試劑盒也不例外,那么對于大鼠ELISA試劑盒來說,應如何做好保存工作呢,接下來就隨著小編一起來看看吧。
  1、大鼠ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  2、濃洗刷液可能會有結晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。
  3、各步加樣均應運用加樣器,并常常校對其準確性,以避免試驗誤差。
  4、請每次測定的一起做規范曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于規范品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(n倍)后再測定,核算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
  我們知道,大鼠ELISA試劑盒實驗通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式,試劑盒操作簡單,涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結果判斷和結果報告及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。大鼠elisa試劑盒正確的加樣方法應為45度,吸頭貼著孔壁加入,應注意角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導致加樣不準確;吸頭應當貼著管壁和液面的交界處。
  此外,凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。
  后一點,血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在大鼠elisa試劑盒中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的大鼠elisa試劑盒測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
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